Набор реагентов «Gene Profile Human» для идентификации личности по 28-ми STR-локусам


Набор реагентов «Gene Profile Human» предназначен для генетической идентификации и определения родства человека.

В основе работы набора лежит мультиплексная амплификация 28-ми STR-локусов с последующим разделением ПЦР-продуктов методом капиллярного электрофореза.

Из них 25 аутосомных локуса:

D3S1358, D2S441, D1S1656, D19S433, TPOX, D2S1338, TH01, D16S539, CSF1PO, D18S51, D21S11, D22S1045, D8S1179, VWA, D5S818, FGA, D13S317, D7S820, D12S391, D10S1248, SE33, DYS391, D8S1132, D7S1517, Penta D, Penta E

и 3 половых локуса:

Amelоgenin, Yindel, DYS391

Представленные в наборе STR-локусы высоко полиморфны, что позволяет достоверно идентифицировать личность.

В набор входят все локусы баз данных CODIS (Combined DNA Index System) и ESS (European Standard Set), а также локусы SE33, Penta D, Penta E.

Используемые в наборе праймеры мечены красителями FAM, R6G, TAMRA, ROX, Sy630. Стандарт длин СД-520 мечен красителем Sy660. Использование шести красителей позволяет одновременно детектировать продукты ПЦР и стандарт длин в одном капилляре.

Таблица 1. Характеристика STR локусов набора GeneProfile Human
КрасительЛокусХромосомная локализацияДиапазон аллелейАллельное состояние ПКО
FAMAmelоgeninXp22.1-22.3XX
Yp11.2YY
D3S13583p21.318-2115, 17
D2S4412p148-1710, 11
D1S16561q428-2118.3, 19.3
D19S43319q125.2-2013, 15
TPOX2p25.34-168, 12
D2S13382q3510-2917, 26
R6GTH0111p15.53-146, 9.3
D16S53916q24.14-1612
CSF1PO5q33.15-1610, 12
D18S5118q21.336-28.315, 16
D21S1121q21.112-41.230, 32.2
TAMRAYindelYq11.2211-22
D22S104522q12.37-2014, 15
D8S11798q24.134-2013
VWA12p13.3110-2517, 18
D5S8185q23.26-1910, 12
FGA4q31.312.2-51.219, 24
ROXD13S31713q31.15-1711
D7S8207q21.115-168, 12
D12S39112p13.213-2818.3, 20
D10S124810q26.37-2113, 14
SE336q143-4325.2, 27.2
Sy630DYS391Y6-1411
D8S11328q12.1-2718, 22
D7S15177q31.216-2822, 25
Penta D21q22.32.2-179
Penta E15q26.25-255, 14

Праймеры для ПЦР подобраны с учетом проведения амплификации всех 28 STR-локусов в одной пробирке. Размер амплифицируемых ПЦР продуктов находится в диапазоне от 60 до 460 пар нуклеотидов (с учетом всех известных аллелей). Наличие 15-ти mini-STR локусов позволяет получить более полный профиль у деградированных образцов. Анализ результатов ПЦР проводится методом капиллярного электрофореза с использованием автоматических генетических анализаторов (например Нанофор 05).

Рисунок 1. Аллельная лестница набора Gene Profile Human
Рисунок 2. Положительный контрольный образец набора Gene Profile Human

Для получения полного (по всем 28-ти STR-локусам) генотипа исследуемого образца достаточно 0,125 нанограмм (нг) не деградированной ДНК. Оптимальное количество ДНК, вносимой в реакцию, составляет 1 нг. Диапазон концентраций ДНК для проведения амплификации составляет от 0,1 до 4 нг в реакцию.

Возможно проведение ПРЦ реакции в объеме 10; 12,5 и 25 мкл. Максимальный объем вносимого в реакцию раствора ДНК может составлять 15 мкл (в случае общего объема реакционной смеси – 25 мкл).

Возможно проведение прямой амплификации с использованием FTA карт или образца буккального эпителия, обработанного реагентом «ГенПреп» (кат. № HG-504).

В состав набора входят:
Реакционная смесь, содержащая полимеразу
Смесь специфических праймеров
Положительный контрольный образец
Аллельная лестница
Размерный стандарт СД-520


Вернуться в раздел