Набор реагентов «Tomato spotted wilt virus-РВ»
Кат. № PH-042
Тосповирус бронзовости томата имеет один из самых больших диапозонов растений-хозяев среди растительных вирусов, в 1986 году Edwarson и Christie был составлен список хостов, который уже тогда включал 271 вид из 34 семейств двудольных и 7 семейств однодольных растений. Основными растения-хозяевами являются перец стручковый Capsicum annuum, латук посевной Lactuca sativa, табак обыкновенный Nicotiana tabacum, томат Lycopersicon esculentum и различные декоративные культуры
Перенос и инфицирование здоровых растений осуществляют трипсы, чаще всего Табачный трипс (Thrips tabaci). Вирус длительное время сохраняется в организме насекомых. Зараженная взрослая особь может быть переносчиком вируса всю жизнь и передавать его потомству.
Обычно заражение происходит от многолетних растений, а распространение от инфицированных томатов незначительно. Иногда заражение осуществляется во время пасынкования. Инкубационный период может длиться от 7 до 25 суток.
Симптомы поражения у растений зависят от условий произрастания, окружающей среды, возраста и могут варьировать от растения к растению. Чаще всего симптомы проявляются в двух формах:
Первая – классическая (обыкновенная) бронзовость. На лицевой стороне листовой пластинки формируются единичные или многочисленные кольца, кружки или пятна угловатой формы. В первое время пятна имеют бронзовый оттенок, впоследствии буреют вследствие некроза. Незрелые плоды покрыты крупными поверхностными концентрической структуры пятнами бледно-коричневого цвета. При созревании плодов они приобретают светло-желтый оттенок. Пятна обычно начинают формироваться около плодоножки, стебель покрывается некротическими продолговатыми пятнами и отмирает верхушечная часть растения.
Вторая форма – некротическая бронзовость. Отличается глубоким проникновением пятен в ткани. Из-за этого пятна на листьях и черешках черные, концентрические. Листья усыхают, а на плодах образуются глубоко проникающие кольца коричнево-черного цвета.
Вирус широко распространен повсеместно в зоне выращивания томатов в открытом грунте. На сегодняшний день вирус бронзовости томата включен в список А2 ЕОКЗР.
«ФИТОСКРИН» — технология быстрой молекулярно-генетической диагностики заболеваний растений методом ПЦР в реальном времени
«Tomato spotted wilt virus-РВ»
Набор реагентов для выявления РНК вируса бронзовости томата методом полимеразной цепной реакции в реальном времени совмещенной с реакцией обратной транскрипции (ОТ-ПЦР-РВ)
Диагностика растений на наличие вируса с помощью набора «Tomato spotted wilt virus-РВ» возможна на всех этапах его вегетационного развития методом полимеразной цепной реакции в реальном времени с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР-РВ).
Набор может быть использован в лабораторных центрах и институтах, проводящих контроль карантинного фитосанитарного состояния растений, в том числе посадочного материала в целях обнаружения РНК вируса бронзовости томата. Набор позволяет качественно определить, содержится ли в образце РНК Tomato spotted wilt virus.
Проведение реакции обратной транскрипции и последующей мультиплексной ПЦР-РВ в наборе реагентов «Tomato spotted wilt virus-РВ» осуществляется последовательно в одной пробирке в течение одного запуска амплификатора без каких-либо дополнительных манипуляций. Набор реагентов «Tomato spotted wilt virus-РВ» позволяет одновременно выявлять в одной реакционной смеси специфичный фрагмент Tomato spotted wilt virus – по каналу флуоресценции FAM/Green, а также внутренний положительный контроль – по каналу флуоресценции R6G/HEX/Yellow.
Первая реакция позволяет обнаружить последовательность специфического фрагмента РНК вируса бронзовости томата. Вторая реакция – ВПК (Внутреннего Положительного Контроля) – необходима для исключения ложноотрицательных результатов.
- Специфичность
Специфичность – ложноотрицательные результаты при анализе образцов растений, содержащих РНК вирусов, отсутствовали, ложноположительные результаты при анализе образцов ДНК растений и РНК вирусов, не содержащих вышеперечисленные специфические фрагменты, отсутствовали.
Набор реагентов апробирован на следующих приборах: «АНК-32 (32М, 48)» (ИАП РАН, г. Санкт-Петербург, Россия), «CFX-96» («BioRad», США), «Rotor Gene» (Qiagen), «DT» («ДНК-технология», Россия)
